Инфекционный перитонит кошек был открыт в 1963 г. Возбудитель, коронавирус, первоначально был назван вирусом инфекционного перитонита кошек. Впоследствии выяснилось, что в крови многих здоровых кошек содержались антитела к этому коронавирусу, и было высказано предположение, что эти кошки были заражены невирулентным коронавирусом, называемым кишечным коронавирусом кошек. В то время считалось, что кишечный коронавирус обитал исключительно в кишечнике и мог вызвать только легкую диарею у котят; однако, последующие исследования показали, что у многих клинически здоровых кошек наблюдалась виремия, следовательно, распространение вируса не ограничивалось только кишечником. Эпидемиологические исследования показали, что до 10% кошек, имеющих антитела к коронавирусу, заболевают инфекционным перитонитом. Сейчас полагают, что вирулентный вирус инфекционного перитонита возникает в результате мутации кишечного коронавируса кошек в организме отдельных животных, у которых затем может развиться перитонит. Поскольку вирус инфекционного перитонита и кишечный коронавирус больше не могли считаться вирусами разных групп, было принято более широкое название "коронавирус кошек". Существует множество штаммов этого вируса, сильно различающихся по вирулентности; однако, надежного метода, позволяющего дифференцировать вирулентные штаммы от авирулентных, нет.
Распространение
Многие кошки, особенно содержащиеся группами, заражены коронавирусом. Процент кошек, реагирующих положительно при серологическом исследовании, составляет:
- 82% на выставках кошек
- 53% породистых кошек
- 28% домашних кошек, содержащихся группами
- около 15% домашних кошек, содержащихся поодиночке.
До 10% кошек, инфицированных коронавирусом и живущих большими группами, заболевают инфекционным перитонитом, тогда как у кошек, живущих поодиночке или маленькими устойчивыми группами, это отмечается редко.
Патогенез
Путь передачи коронавируса главным образом алиментарный, через зараженные фекалии. При заражении через ротовую или носовую полость первоначальная репликация вируса происходит в эпителиальных клетках глотки, дыхательного тракта или кишечника. Большинство инфекций на этой стадии протекают бессимптомно. Могут наблюдаться признаки легкого энтерита, но возможна хроническая или тяжелая диарея. Большинство кошек со временем избавляются от вируса, и перитонит не развивается.
У некоторых кошек после репликации вируса в эпителиальных клетках развивается виремия, приводящая к инфекции клеток-мишеней – макрофагов. Вирус-специфичные антитела могут увеличить инфекционность вируса в отношении макрофагов; кошки с вирусным перитонитом часто имеют высокие титры антител против коронавируса. Вирус связывается с антителами, образуя иммунные комплексы, которые накапливаются в стенках мелких кровеносных сосудов, где активируют комплемент и каскады коагуляции, что приводит к иммуноопосредованному васкулиту. После этого возможны два варианта развития патологии. Первый, вовлечение в процесс многих кровеносных сосудов приводит к увеличению их проницаемости и скоплению богатого белками выпота в полостях тела и других пространствах, иногда включая сердечную сумку и мошонку. Результатом этого процесса является развитие экссудативного, или «влажного», перитонита. Второй вариант: при поражении меньшего количества сосудов течение перитонита более хроническое, характеризующееся образованием отдельных пиогранулем в различных тканях тела. В результате развивается неэкссудативная, или "сухая", форма перитонита.
Факторы, определяющие, разовьется ли патология у кошки, зараженной коронавирусом, включают:
штамм: различные штаммы коронавируса различаются по вирулентности
доза: заражение вирусом в более высоких титрах увеличивает риск развития перитонита
стресс: кошки с перитонитом обычно подвергались стрессу за 3–6 недель до заболевания экссудативным инфекционным перитонитом, и за несколько месяцев до заболевания сухим перитонитом
Генетически обусловленная восприимчивость – вероятно, некоторые породы кошек более восприимчивы. Это дает основания предположить, что существует генетическая предрасположенность к развитию инфекционного перитонита, возможно, имеющая отношение к определенным локусам гена главного комплекса гистосовместимости.
Клинические признаки. Анамнез
Экссудативный ("влажный") и неэкссудативный ("сухой") перитонит протекают с разными симптомами. Так как они отображают разные стороны одного клинического процесса, в некоторых случаях наблюдаются признаки обеих форм. Данные анамнеза и клинические признаки инфекционного перитонита варьируют в широких пределах, в зависимости от формы заболевания. В дополнение к обычным анамнестическим данным, для диагностики перитонита существенны некоторые другие факторы:
Не была ли кошка взята от заводчика, из приюта, где содержится много животных, или гостиницы для животных в последние несколько недель или месяцев? В этих ситуациях вероятность заражения коронавирусом больше
Подвергалась ли кошка стрессу в последние несколько недель, например, не было ли смены жилища или хирургических вмешательств? Экссудативный перитонит, острая форма инфекционного перитонита, обычно развивается в течение 3–6 недель после стрессовой ситуации в жизни кошки
Возраст кошки? Несмотря на то, что перитонитом болеют кошки всех возрастов, 80% заболевших животных моложе 2 лет. Кошки обоих полов одинаково восприимчивы
Порода кошки? Хотя болеют кошки любых пород, породистые кошки составляют гораздо больший процент
Не было ли в анамнезе диареи, кашля или чихания в последние несколько недель? Диарея и легкие респираторные симптомы могут предшествовать развитию обеих форм скоротечного инфекционного перитонита
Не было ли в анамнезе контакта с кошками, особенно из одного помета, больных инфекционным перитонитом?
Клинический осмотр
Экссудативный или "влажный" инфекционный перитонит. При экссудативном перитоните преобладают следующие признаки:
Асциты и/или выпоты в плевральную полость
Активность и сохраненный аппетит, либо вялость и анорексия
В некоторых случаях легкая лихорадка; имеет склонность к колебаниям
При выпоте в плевральную полость – нарушения дыхания
Потеря веса
При пальпации – увеличенные мезентериальные лимфатические узлы и печень
Распространение патологического процесса с вовлечением других органов брюшной полости (это приводит к появлению симптомов их дисфункции, например, гепатопатии, почечной недостаточности, заболеваний поджелудочной железы)
Поражение центральной нервной системы и глаз – иногда отмечаются при выпотном перитоните, хотя более характерны для сухого.
Неэкссудативный или "сухой" перитонит. Клинические признаки часто слабо выражены, неспецифичны и разнообразны; это состояние – одно из самых трудно диагностируемых.
К характерным признакам относятся:
Потеря веса
Отсутствие аппетита
Другие симптомы зависят от того, какие органы поражены, и от степени их поражения. К ним относятся:
Глаза – увеиты, отложения на роговице, помутнение стекловидного тела и опалесценция водянистой влаги, лимфоцитарная инфильтрация сосудов сетчатки, пиогранулема сетчатки
Центральная нервная система – образование пиогранулем и развитие гидроцефалии, приводящие к нистагму, вестибулярным расстройствам (например, наклон головы), судорогам, мозжечковая атаксия, дисфункция черепных нервов, парезы, потеря проприоцептивной чувствительности, недержание мочи или изменения в поведении. Нервные симптомы отмечаются в 10% случаев сухого инфекционного перитонита кошек
Кишечник – утолщение стенки толстой кишки
Мезентериальные лимфатические узлы – увеличены при пальпации
Печень – желтуха и увеличение размеров
Почки – пиогранулемы, могут пальпироваться.
Дифференциальный диагноз
В табл. 1 перечислены основные дифференциальные диагнозы экссудативного перитонита и указаны способы дифференциации. Особенно трудно дифференцировать экссудативную форму перитонита от воспалительного лимфоцитарного холангита. Оба заболевания могут протекать с похожими симптомами: потерей веса, анорексией и асцитами. Характер асцитной жидкости одинаковый в обоих случаях , изменения биохимических свойств сыворотки и гематологических свойств также сходны, хотя у кошек с инфекционным перитонитом больше вероятность развития нерегенеративной анемии. Другие симптомы могут помочь дифференцировать эти заболевания, например, увеиты или плевральный выпот при инфекционном перитоните. Кошки с лимфоцитарным холангитом, как правило, более активны, чем кошки с перитонитом, и иногда отмечается полифагия. При невозможности дифференциации по клиническим признакам может потребоваться биопсия печени.
В табл. 2 перечислены основные дифференциальные диагнозы для сухого перитонита.
Табл. 1:
дифференциальные диагнозы при выпотном инфекционном перитоните кошек и методы дифференциации. Состояния перечислены по порядку: наиболее часто встречающиеся ошибочные диагнозы – в начале таблицы, менее частые – в конце
Патология
Способ дифференциации от инфекционного перитонита
Кардиомиопатия
Транссудат с низким содержанием белка (менее 35 г/л). Рентгенография может обнаружить увеличенное или круглое сердце. УЗИ сердца
Если асцитная жидкость похожа скорее на измененный транссудат, чем на экссудат, инфекционный перитонит можно исключить. Однако, при некоторых патологиях печени, связанных с обструкцией сосудов после гепатита, выпот может содержать большое количество белка, как при инфекционном перитоните. Можно исследовать асцитную жидкость методом обратной ЦПР; если это невозможно, может потребоваться диагностическая лапаторомия и биопсия. Для диагностики цирроза полезен тест на стимуляцию образования желчных кислот
Опухоли печени
Как и в предыдущем случае, опухоль диагностируется с помощью УЗИ
Гнойные серозиты
Зловонный опалесцирующий экссудат, содержащий бактерии и большие количества лейкоцитов с дегенеративными нейтрофилами
Лимфосаркома
При лимфосаркоме тимуса рентгенография грудной клетки в боковой проекции может обнаружить новообразование краниальнее сердца и, возможно, высокое расположение пищевода. При лимфосаркоме в брюшной полости возможно увеличение органов. При анализе жидкости обычно обнаруживается низкое содержание белка, клеточная популяция состоит скорее из лимфоцитов, чем из нейтрофилов и макрофагов
Беременность
Диагностика пальпацией живота; невозможно откачать жидкость при парацентезе, на рентгенограмме или при УЗИ матки можно рассмотреть котят
Ожирение
Диагностика пальпацией живота, невозможно откачать жидкость при парацентезе, на УЗИ и рентгенограмме нет признаков асцита
Табл. 2:
Дифференциальные диагнозы для разнообразных клинических проявлений при сухом инфекционном перитоните кошек
Вопреки многим утверждениям, простых методов диагностики инфекционного перитонита у живого животного, кроме биопсии и гистологии пораженных тканей, не существует. Многие имеющиеся тест-системы выявляют заражение коронавирусом, и обратная ПЦР определяет коронавирус кошек (см. далее). Ни одним методом нельзя отличить вирулентный штамм коронавируса от авирулентного, хотя некоторые методы позволяют дифференцировать изоляты, полученные в лаборатории. В большинстве случаев диагноз «инфекционный перитонит кошек» (любой формы), поставленный на основании клинических признаков и анамнеза, требует дополнительного исследования несколькими диагностическими методами, по результатам которых, соответствующим друг другу, можно предположить это заболевание.
Эти методы включают:
Клиническую патологию для диагностики поражения органов
Анализ выпота брюшной или грудной полости
Серологические тесты для выявления заражения вирусом
Обратную ЦПР для определения вируса
Гистопатологическое исследование пораженных тканей - это единственный метод, позволяющий поставить окончательный диагноз инфекционного перитонита.
В табл. 3 перечислены разные методы и примеры их использования.
Табл. 3: лабораторные методы, использующиеся для диагностики инфекционного перитонита кошек, и материалы, необходимые для исследования каждым методом
Тест определяет
Имеющиеся тест-системы
Клинические ситуации, в которых можно использовать метод
Антитела
Метод иммунофлуоресценции, твердофазный иммуноферментный анализ (например, IDEXX Snap*) immunocomb® иммуноиммиграционный экспресс-анализ*
Диагностика инфекционного перитонита кошек (в сочетании с другими методами и клиническим осмотром)
Проверка кошек, бывших в контакте с больными перитонитом, чтобы определить, может ли он быть инфекционным
Проверка перед спариванием
Проверка животных в семье на присутствие коронавируса
Проверка перед подселением кошки к животным, свободным от коронавируса
Вирус
Обратная ПЦР
Диагностика экссудативного инфекционного перитонита (для анализа берут выпот)
Исследование кошки, бывшей в контакте с больными перитонитом, чтобы выяснить, был ли он инфекционным; требуются повторные исследования
Проверка животных в семье на присутствие коронавируса
Проверка перед подселением к животным, свободным от коронавируса; требуются повторные исследования
Вирус в тканях
Иммуногистохимия
Постановка окончательного диагноза, особенно при сомнительных результатах гистологии
Патологические изменения
Гистопатология
Постановка окончательного диагноза
Табл. 4: список диагностических методов, позволяющих определить контакт с источником инфекции или инфекцию коронавирусом кошек, и клинические ситуации, для которых рекомендуются методы.
*не рекомендуется авторами; в их практике результаты не коррелировали со стандартными методами
Клиническая патология
Изменения биохимии сыворотки зависят от поражения органов и длительности заболевания. Гиперглобулинемия (иногда моноклональная гаммопатия) и увеличенная концентрация α1-кислого гликопротеина отмечаются постоянно (см. ниже). Неспецифические изменения в составе крови могут включать нейтрофилию (часто со сдвигом влево), лимфопению и нерегенеративную анемию. Подобные изменения более характерны для сухого перитонита. Возможны коагулопатии.
Природа перитонеальной жидкости
Анализ жидкости позволяет выявить изменения, характерные для инфекционного перитонита, или исключить его. Выпот при инфекционном перитоните обычно характеризуется следующими свойствами:
Обычно соломенного цвета и всегда стерильный
Высокое содержание белка (более 35 г/л), пенится при встряхивании, при стоянии в течение нескольких часов при комнатной температуре могут образовываться сгустки
При соотношении альбумины/глобулины менее 0,4, вероятность того, что это инфекционный перитонит, высокая; более 0,8 это маловероятно; при значении между 0,4 и 0,8 это возможно, но неопределенно
Концентрация α1-кислого гликопротеина более 1500 мг/мл (Дути и др., 1997) характерна для инфекционного перитонита
Общее количество ядерных клеток менее 5000 клеток/мл (в основном нейтрофилы и макрофаги)
При исследовании методом обратной ЦПР реакция положительная (см. далее)
Серологические методы
Серологические методы используются:
для исследования кошек с подозрением на инфекционный перитонит
для исследования кошек, бывших в контакте с кошками, возможно, больными инфекционным перитонитом
по желанию заводчика кошек
для проверки кошек, живущих в доме, на присутствие коронавируса
для проверки кошек перед подселением к другим, свободным от коронавируса.
Интерпретация результатов серологических методов может вызывать затруднения, поскольку:
Кошки со сходными клиническими признаками могут случайно дать положительную реакцию, особенно породистые; следовательно, не смотря на то, что высокие титры антител у кошек в сочетании с клиническими признаками характерны для перитонита, это не имеет диагностического значения
Некоторые кошки с экссудативным перитонитом имеют низкие титры антител или реагируют отрицательно, возможно, из-за огромного количества вирусных частиц в организме, в результате чего все антитела оказываются связанными и, следовательно, неспособными связаться с антигенами тест-системы. Некоторые серологические тесты определяют наличие антител, не измеряя титров (например, иммуноиммиграционный экспресс-метод, Snap), в то время как другие (Immunocomb®, иммунофлуоресцентный метод) позволяют определить титры. Результаты, выраженные в титре, удобны для мониторинга отдельных кошек или группы кошек одного владельца на предмет избавления от коронавируса Интерпретация результатов серологических тестов у всех кошек.
Интерпретация результатов серологических тестов у всех кошек
Экссудативный инфекционный перитонит: хотя серологические методы используются для диагностики экссудативного инфекционного перитонита, применять их следует только в случаях, когда клинические признаки, отношение альбумин/глобулин, содержание α1-кислого гликопротеина и цитологические свойства выпота характерны для перитонита. Кошки с экссудативным перитонитом могут реагировать отрицательно, но могут и иметь антитела, в том числе в высоких титрах. Кошки с другими заболеваниями могут иногда иметь антитела к коронавирусу, особенно если в доме есть другие кошки, или если они взяты из приюта или от заводчика в последние 6–12 месяцев.
Сухой инфекционный перитонит: титры антител к коронавирусу, определенные иммунофлуоресцентным методом, обычно равны 640 или выше. Титры менее 160 почти всегда позволяют исключить сухой перитонит. Обнаружение антител у здоровой кошки принимать за раннюю стадию сухого перитонита ошибочно.
Интерпретация результатов серологических тестов у здоровых кошек
Проверка здоровых кошек, бывших в контакте с больными: здоровых кошек, контактировавших с больными инфекционным перитонитом или источниками инфекции, проверяют по одной из двух причин, описанных ниже. В любом случае нужно пояснить владельцу, что кошка с большой вероятностью окажется сероположительной. Заражаются почти все кошки, контактировавшие с источником инфекции. Это не означает плохого прогноза, так как перитонит развивается менее чем у 10% инфицированных кошек; чаще всего организм освобождается от вируса и животные начинают реагировать отрицательно.
В ситуации, когда владелец собирается завести другую кошку взамен умершей от инфекционного перитонита и хочет знать, распространяет ли вирус кошка, контактировавшая с больной:
Если кошка, контактировавшая с больной, при серологическом исследовании реагирует отрицательно, маловероятно, что она инфицирована, и, следовательно, не распространяет вирус; заводить новую кошку безопасно
Если кошка реагирует положительно (то есть имеет титр антител 1:10 или более), существует 1 шанс из 3, что она распространяет коронавирус, таким образом, заводить другую кошку будет неразумно (за исключением случаев, когда новая кошка имеет антитела, показывающие, что она контактировала с источником инфекции). Кошку нужно исследовать повторно спустя 3–6 месяцев, чтобы установить, снизился ли титр антител. У большинства кошек, освободившихся от вируса, антитела исчезают в период от 3 месяцев до нескольких лет. В идеале, кошек, реагирующих положительно, надо отделять от отрицательно реагирующих кошек, живущих в доме. Как только кошка начинает реагировать отрицательно, ее следует переместить в соответствующую группу во избежание реинфекции от других кошек.
Если владелец хочет знать прогноз для кошки, контактировавшей с источником инфекции:
Если кошка реагирует отрицательно, она, вероятнее всего, не инфицирована и не заболеет инфекционным перитонитом
Если кошка реагирует положительно, она может заболеть перитонитом, но вероятность этого мала (менее 1:10)
Проверка племенных кошек: заводчики часто просят исследовать животных перед спариванием.
В этом случае:
Кошка, реагирующая отрицательно, вероятнее всего, не инфицирована и не выделяет вирус, следовательно, может спариваться с животными, реагирующими отрицательно
Если кошка реагирует положительно, будет разумным найти партнера, также реагирующего положительно, чтобы уменьшить риск заноса заболевания в группу, свободную от вируса. Для предотвращения инфекции котят необходимы изоляция и ранний отъем.
Проверка группы кошек на коронавирус: случайная выборка 3 или 4 кошек, живущих вместе, для исследования покажет, является ли коронавирус эндемичным, поскольку он высоко контагиозен. Дома, в которых содержится менее 10 кошек или где кошки живут изолированными друг от друга группами по 3 или менее животных, часто в конечном счете избавляются от инфекции. Исследование каждые 6–12 месяцев поможет выяснить, когда это произойдет, так как титр антител падает и больше кошек начинает реагировать отрицательно. Во избежание повторной инфекции рекомендуется отделить отрицательно реагирующих кошек от положительно реагирующих.
Проверка кошки, подселяемой к группе, свободной от коронавируса: в группы, свободные от инфекции, должны вводиться только кошки, реагирующие отрицательно. Кошек, имеющих антитела, можно изолировать и повторно исследовать через каждые 3–6 месяцев, пока результат не станет отрицательным.
Обратная ПЦР
Обратная полимеразная цепная реакция амплифицирует выбранную часть вирусной нуклеиновой кислоты до концентраций, позволяющих ее определить. Метод чувствителен, но требует строгих мер предосторожности, чтобы избежать контаминации, приводящей к ложноположительным результатам. Некоторые лаборатории утверждают, что имеют тест-системы на основе обратной ПЦР для диагностики инфекционного перитонита, и могут даже предсказать вероятность развития перитонита у здоровой кошки; однако, на момент написания книги, при анализе последовательностей генов нескольких штаммов вируса инфекционного перитонита и кишечного коронавируса кошек мутация, отвечающая за вирулентность, обнаружена не была. Из-за вариабельности генома коронавируса маловероятно, что когда-либо появится тест-система, позволяющая различить вирулентные и невирулентные штаммы (Хорзинек, 1997). Для исследования можно брать фекалии, кровь, слюну или выпот, хотя мониторинг выделения вируса со слюной бесполезен, так как оно прекращается задолго до прекращения выделения с фекалиями.
Обратную ПЦР можно использовать для диагностики инфекционного перитонита:
Присутствие коронавирусной РНК в выпоте является вероятным, но не окончательным признаком инфекционного перитонита
Положительные результаты при исследовании крови методом ПЦР не позволяют поставить диагноз "инфекционный перитонит", так как здоровые кошки или кошки, больные другими заболеваниями, также могут реагировать положительно
Отрицательный результат, полученный при исследовании крови методом обратной ПЦР, не исключает возможность инфекционного перитонита, так как больные кошки могут реагировать отрицательно.
Обратная ЦПР может использоваться для мониторинга распространения вируса в доме, где проводится контроль над заболеванием. Кошек можно разделить на 3 типа:
Большинство кошек, инфицированных коронавирусом, некоторое время распространяют вирус, имеют антитела, затем выделение прекращается и антитела пропадают; затем кошки инфицируются повторно и цикл повторяется.
Небольшая группа кошек является носителями вируса и распространяет его постоянно.
Небольшая группа кошек проявляет устойчивость к распространению вируса.
Табл. 5 схема мероприятий по профилактике коронавирусной инфекции у котят
Подготовка помещения для котят
1. удалите всех кошек и котят за неделю до того, как помещать мать
2. продезинфицируйте помещение раствором гипохлорита в разведении 1:32
3. выделите корзинки для котят, миски для корма и воды специально для этого помещения и продезинфицируйте их раствором гипохлорита
4. поместите в помещение кошку за 1–2 недели до родов
Профилактика непрямого распространения вируса
1. входите в комнату с котятами до посещения помещений с другими кошками
2. мойте руки с дезинфектантом перед входом в комнату для котят
3. надевайте сменную обувь или бахилы при входе в комнату
Ранний отъем и изоляция котят
1. исследуйте кошку на антитела к коронавирусу перед или после окота
2. если титр у матери больше нуля, котят следует поместить в отдельную чистую комнату до 5–6 недельного возраста
3. если титр антител матери равен нулю, котят можно оставить с ней до более старшего возраста
4. позаботьтесь о том, чтобы приучить котят в возрасте 2–7 недель, находящихся в изоляции, к человеку
Исследование котят
исследуйте котят на антитела к коронавирусу в возрасте старше 10 недель, чтобы убедиться, что они реагируют отрицательно
Общая патология/гистопатология
Серозные поверхности часто покрыты фибринозными наложениями, диаметром 1–2 мм. В отдельных органах могут обнаруживаться крупные гранулемы. Множественные опухоли и другие инфекции (например, туберкулез) могут протекать со сходными признаками. Печень, сальник и кишечник можно исследовать с помощью биопсии, в то время как ткани глаза и центральной нервной системы доступны только для посмертного исследования. Гистологическое исследование позволяет поставить окончательный диагноз.
Иммуногистохимия
Следующий метод диагностики в случаях, когда с помощью гистологии ясно идентифицировать инфекционный перитонит не удается.
